關(guān)鍵詞：質(zhì)譜分析蛋白質(zhì)修飾泛素化,蛋白質(zhì)組學(xué),代謝組學(xué),tmt,抗體測(cè)序,itraq,蛋白質(zhì)譜鑒定,蛋白質(zhì)組學(xué),代謝組學(xué),tmt,抗體測(cè)序,itraq,蛋白質(zhì)譜鑒定"

泛素化修飾（Ubi）是真核生物中常見(jiàn)的蛋白質(zhì)翻譯后修飾方式，指小分子多肽泛素在相關(guān)酶的作用下通過(guò)級(jí)聯(lián)反應(yīng)以共價(jià)鍵連接在底物蛋白或目標(biāo)蛋白的氨基酸殘基上的過(guò)程。

泛素化修飾質(zhì)譜分析就是利用質(zhì)譜技術(shù)對(duì)泛素化修飾進(jìn)行鑒定，包括泛素化修飾定性鑒定、泛素化位點(diǎn)鑒定以及泛素化水平鑒定等。由于正常生理狀態(tài)下泛素化水平較低，在進(jìn)行質(zhì)譜鑒定前，有必要對(duì)泛素化肽段進(jìn)行分離富集，以提高泛素化肽段的豐度。利用質(zhì)譜技術(shù)分析泛素化蛋白質(zhì)的大致流程為先將蛋白質(zhì)酶解消化為小分子肽段，通過(guò)親和色譜等技術(shù)對(duì)泛素化肽段進(jìn)行分離富集，再利用質(zhì)譜儀進(jìn)行串聯(lián)質(zhì)譜分析，檢測(cè)各肽段的分子質(zhì)量。與發(fā)生了泛素化修飾的肽段相比，沒(méi)有發(fā)生泛素化修飾的肽段分子分子質(zhì)量剛好增加了泛素分子的相對(duì)分子質(zhì)量，以此作為依據(jù)可以對(duì)泛素化肽段或蛋白進(jìn)行鑒定，再將初步鑒定為泛素化的肽段進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜分析，可以對(duì)其進(jìn)行的驗(yàn)證。

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