1 范圍

本標準規定了實驗動物90天經口毒性試驗的基本試驗方法和技術要求。

本標準適用于評價受試物的亞慢性毒性作用。

2 術語和定義

2.1 亞慢性毒性

實驗動物在不超過其壽命期限10%的時間內(大鼠通常為90d),重復經口接觸受試物后引起的健康損害效應。

2.2 未觀察到有害作用劑量

通過動物試驗，以現有的技術手段和檢測指標未觀察到任何與受試物有關的毒性作用的*大劑量。

2.3 *小觀察到有害作用劑量

在規定的條件下,受試物引起實驗動物組織形態、功能、生長發育等有害效應的*小作用劑量。

2.4 靶器官

實驗動物出現由受試物引起明顯毒性作用的器官。

2.5 衛星組

在毒性研究設計和實施中外加的動物組,其處理和飼養條件與主要研究的動物相似,用于試驗中期或試驗結束恢復期觀察和檢測，也可用于不包括在主要研究內的其他指標及參數的觀察和檢測。

3 試驗目的和原理

確定在90d內經口重復接觸受試物引起的毒性效應，了解受試物劑量-反應關系、毒作用靶器官和可逆性,得出90d經口*小觀察到有害作用劑量(LOAEL)和未觀察到有害作用劑量(NOAEL),初步確定受試物的經口安全性,并為慢性毒性試驗劑量、觀察指標、毒性終點的選擇以及獲得“暫定的人體健康指導值”提供依據。

4 儀器和試劑

4.1 儀器/器械

實驗室常用解剖器械、電子天平、生物顯微鏡、檢眼鏡、血生化分析儀、血液分析儀、凝血分析儀、尿液分析儀、心電圖掃描儀、離心機、病理切片機等。

4.2 試劑

甲醛、二甲苯、乙醇、蘇木素、伊紅、石蠟、血球分析儀稀釋劑、血生化分析試劑、凝血分析試劑、尿液分析試劑(或試紙)等。

5 試驗方法

5.1 受試物

受試物應使用原始樣品，若不能使用原始樣品，應按照受試物處理原則對受試物進行適當處理。將受試物摻入飼料、飲用水或灌胃給予。

5.2 實驗動物

5.2.1 動物選擇

實驗動物的選擇應符合GB14922.1和GB14922.2的有關規定。選擇已有資料證明對受試物敏感的動物物種和品系，一般嚙齒類動物**大鼠,非嚙齒類動物**犬(通常選用BeagIe 犬)。大鼠周齡推薦不超過6周，體重50g~100g。試驗開始時每個性別動物體重差異不應超過平均體重的±20%,每組動物數不少于20只,雌雄各半;若計劃試驗中期觀察或試驗結束做恢復期的觀察,應增加動物數(對照和高劑量增加衛星組，每組10只，雌雄各半)。犬通常選用4個月～6個月的幼犬，一般不超過9個月，試驗開始時每個性別動物體重差異不應超過平均體重的±20%,每組動物數不少于8只，雌雄各半;若計劃試驗中間尸檢或試驗結束做恢復期的觀察,應增加動物數(對照和高劑量增加衛星組,每組4只,雌雄各半)。對照組動物性別和數量應與受試物組相同。

5.2.2 動輸準備

試驗前大鼠在實驗動物房至少應進行3d～5d(犬7d～14d)環境適應和檢疫觀察。

5.2.3 動物飼養

實驗動物飼養條件應符合GB14925、飲用水應符合GB5749、飼料應符合GB14924的有關規定。試驗期間動物自由飲水和攝食,動物推薦單籠飼養,大鼠也可按組分性別分籠群飼,每籠動物數(一般不超過3只)應滿足實驗動物*低需要的空間，以不影響動物自由活動和觀察動物的體征為宜。試驗期間每組動物非試驗因素死亡率應小于10%,瀕死動物應盡可能進行血液生化指標檢測、大體解剖以及病理組織學檢查，每組生物標本損失率應小于10%。